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苹果属观赏海棠是果树植物中兼具观赏价值和经济价值的重要资源,在城市绿化中具有良好的应用前景。培育出极具观赏价值的红叶品种一直是育种工作者努力的方向。转基因育种为这一目标提供了可能,而转基因育种的的实现要依靠稳定的遗传转化体系。建立观赏海棠离体叶片高效再生体系不仅是苗木快速繁殖的有效途径,更是用叶片作为受体材料构建遗传转化体系的重要前提。另外,花色苷的代谢及稳定性易受外界环境因子和外源化学物质的影响。研究这些因素对观赏海棠花色苷代谢的影响机制,是制定促进观赏海棠叶片花色苷稳定性和色彩有效表达的人工管理措施的科学基础,也是实现调控观赏海棠叶片色泽发育目标的重要途径。为此,本文做了以下三个方面的研究。第一:研究建立观赏海棠离体叶片的高效再生体系。得出:诱导“火焰”和“草莓果冻”叶片再生的最适培养基是MS+TDZ4.6μM+NAA1.0μM;诱导“王族”叶片再生的最适培养基是MS+TDZ4.6μM+NAA2.5μM。采用新叶,叶片正面朝上放置,黑暗处理10天有利于观赏海棠叶片再生。适当高浓度的蔗糖能够促进叶片再生。高浓度的6-BA和蔗糖能促进观赏海棠增殖。诱导“火焰”、“草莓果冻”、“王族”生根最适培养基分别是MS+IBA5.0μM、MS+IBA4.0μM+NAA0.5μM、MS+IBA4.0μM。第二:研究观赏海棠遗传转化过程的一些影响因素,为成功构建其遗传转化体系提供良好基础。得出:转基因选择标记抗生素Ka的适宜浓度为5mg/L。适宜的抑菌抗生素是Cef,浓度为400mg/L。农杆菌菌液侵染叶片10-15min,共培养3天,有利于抗性不定芽的再生。第三:研究不同环境因子和相关外源物质对观赏海棠花色苷代谢的影响。得出:高浓度的蔗糖能够促进叶片中花色苷的积累。氮素缺乏能够促进叶片花色苷的积累。适当的低酸度有利于叶片中花色苷的积累。光照对叶片中花色苷的积累影响很大,花色苷的含量随光照时间的增长显著增加。温度对叶片中花色苷积累的的影响表现为高温抑制花色苷的积累,低温促进花色苷的积累。


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